江西省南昌市青山湖区南昌市第一中学2023-2024高二下学期4月期中生物试题（文字版含解析）

江西省南昌市青山湖区南昌市第一中学2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1．我国古代最早酿造葡萄酒采用的是将葡萄破碎成浆的自然发酵酿酒法，后来出现了向葡萄汁中加入“曲蘖”的酿造方法。下列叙述正确的是（ ）
A．用于自然发酵酿酒法的葡萄可先去皮，有利于破碎成浆
B．葡萄汁中加入的“曲蘖”含有酵母菌，可加快酒精发酵
C．酿造葡萄酒需使用密闭性较好的容器，定期打开盖子放气
D．若发酵产物变酸，可能是容器密闭不严，酵母菌进行了有氧呼吸
2．微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。如图为酵母菌的纯培养的部分操作步骤，下列说法正确的是（ ）
A．完成步骤④的过程中，接种环共灼烧处理了5次
B．以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基中加入尿素和酚红的目的是相同的
C．该接种方法可用于获得酵母菌的纯培养物
D．接种后，待菌液被培养基吸收，将④倒置培养，皿盖上标注菌种及接种日期等信息
3．如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析错误的是（　　）
A．某一稀释度下至少涂3个平板，以减小实验误差
B．3号试管中的样品溶液稀释倍数为104倍
C．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×107个
D．该实验需设置牛肉膏蛋白胨培养基作对照，用以判断选择培养基是否有选择作用
4．摇摆式间歇浸没生物反应器通过摆动架的倾斜摆动，使培养液周期性间歇浸没组培苗，实现组培苗的快速生长。相关叙述正确是（ ）
A．获得组织苗的培养基含有水、无机盐、蔗糖、琼脂和激素等多种营养物质
B．获得组培苗的步骤：外植体→脱分化形成胚状体→再分化形成试管苗
C．间歇摆动提高培养液溶氧量，有利于组培苗进行有氧呼吸，提高生长速度
D．经过间歇浸没培养获得的植株需要消毒后炼苗再移栽到经灭菌处理的土壤中
5．临床上常对羊水中胎儿脱落的细胞进行染色体分析，得出染色体数量以及结构变异的重要信息，辅助医生产前诊断。具体操作步骤如下图所示，下列选项中说法错误的是（　　）
A．秋水仙素处理可抑制纺锤体的形成，便于进行染色体分析
B．实验中低渗处理的目的是使细胞吸水膨胀，使染色体分散便于观察
C．细胞培养过程中需适时更换培养液，防止代谢产物积累过多危害细胞生长
D．利用该技术能够检测镰状细胞贫血、唐氏综合征等染色体异常遗传病
6．双特异性抗体是指同时具有两种抗原结合位点的人造抗体，研究人员用新的技术构建了一种双特异性抗体，该抗体可同时特异性识别肝癌细胞上的GPC-3以及T淋巴细胞表面的特殊蛋白质CD3。下图表示该双特异性抗体的制备过程，下列相关叙述错误的是（ ）

A．图1中过程②可使用灭活的病毒诱导细胞融合，此方法也可用于诱导植物体细胞融合
B．HAT培养基会抑制单个的骨髓瘤细胞和骨髓瘤-骨髓瘤细胞的增殖，而B淋巴细胞分裂能力弱，只有杂交瘤细胞可以正常增殖
C．由图2可知，该双特异性抗体可同时识别肝癌细胞膜上的GPC-3和T淋巴细胞膜上的CD3，从而将肝癌细胞和T淋巴细胞紧密接近（将T细胞定向带到癌细胞所在的位置），有利于T淋巴细胞特异性地杀伤肝癌细胞，促使巨噬细胞吞噬肝癌细胞
D．培养淋巴细胞时，除必须保证环境是无菌、无毒外，还必须定期更换培养液，提供的气体环境应为95%的空气和5%的CO2
7．将取自一个胚胎的胚胎干细胞(ES)注射到发育中的另一个胚胎内，可发育形成拥有不同基因型细胞的嵌合体。2023年，中国科学家培育出世界上首只高比例胚胎干细胞“嵌合食蟹猴”，其多种组织中含有供体干细胞来源的细胞。下列叙述错误的是（　　）
A．胚胎干细胞存在于早期胚胎中，有形成个体的潜能
B．供体ES在受体胚胎内可分化出成体干细胞
C．诱导多能干细胞可作为供体ES的“替代品”培育嵌合体
D．受体胚胎接受移植的最佳时机是发育至原肠胚阶段
8．下列有关基因工程说法中，错误的是（　　）
A．基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿定向地改造生物，培育出新品种
B．质粒常作为基因工程的载体，是存在于细菌和酵母菌等生物细胞中的一种细胞器
C．细菌细胞内的基因可在植物细胞内表达是因为所有生物共用一套密码子
D．对于基因工程或分子生物学实验室向外排放转基因细菌等必须严加管制
9．大肠杆菌经溶菌酶和阴离子去垢剂（SDS）处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中。利用上述原理可初步获得质粒DNA。下列关于质粒的粗提取和鉴定的分析错误的是（ ）
A．DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精，可以用冷酒精析出上清液中的DNA
B．DNA能溶于2mol/L的NaCl溶液，可用二苯胺试剂在沸水加热条件下鉴定DNA
C．用限制酶I和Ⅱ处理提取的产物，电泳出现图结果，说明未提取到质粒
D．用琼脂糖凝胶电泳鉴定质粒，被染色的质粒还需要通过紫外灯照射才能看到结果
10．HIV感染是引起艾滋病的原因。利用进入抑制剂阻止HIV进入靶细胞是阻止 HIV感染的重要途径。研究者按照如图所示的途径构建了一种可视化的、无感染性的进入抑制剂检测模型。
下列说法正确的是（　　）
A．env蛋白是介导HIV侵染靶细胞的重要蛋白
B．进入抑制剂通过破坏env蛋白结构阻止HIV侵染
C．通过测定融合细胞中env表达量判定进入抑制剂的效果
D．进行上述系统操作的实验员有感染HIV的风险
11．甲、乙、丙三名同学分别以酵母菌为材料进行PCR扩增，再取20ul扩增产物进行凝胶电泳，结果如图。下列叙述错误的是（ ）

A．PCR反应需要脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶和解旋酶等
B．PCR以DNA半保留复制为原理，子链的延伸方向为5’→3’
C．甲同学扩增得到DNA分子的数量比乙同学多
D．丙同学所用的引物可能与甲乙同学不一样
12．下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图 1、图 2 中箭头表示相关限制酶的酶切位点。下列说法正确的是（ ）
限制酶 BamHI HindⅢ EcoRI SmaI
识别序列及切割位点 G↓GATC C C CTAG↑G A↓AGCT T T TCGA↑A G↓AATT C C TTAA↑G CCC↓GGG GGG↑CCC
A．重组 DNA 技术所用的工具酶是限制酶、DNA 连接酶和运载体
B．只有用同种限制酶切割 DNA 产生的黏性末端才能互补
C．用图中质粒和外源基因 DNA 构建重组质粒，可使用 SmaⅠ切割
D．使用 EcoRⅠ同时处理质粒和外源 DNA，可能会发生质粒或者目的基因的自身环化
二、多选题
13．自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌，将玉米种子用自身固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图。以下叙述正确的是（　　）
A．步骤①土样应取自当地表层土壤；步骤③将土壤悬浮液稀释了1000倍
B．自生固氮菌是自养型生物，不可用血细胞计数板来计数土壤悬浮液中的菌体数
C．步骤②需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中
D．步骤④所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源
14．柑橘花叶病毒（CiMV）能引起柑橘果皮出现各种绿色花纹，使其商业价值下降。CiMV 外壳蛋白中 11-475 残基（485taa）的肽具有较强的免疫原性。为及早发现并消除受感染的树木，研究人员利用动物细胞工程技术开发了一种针对 CiMV 的灵敏且快速的兔源性单克隆抗体（mAb）诊断试剂盒。下列说法正确的是（　　）
A．制备 mAb 过程中，需用 CiMV 的 485aa 对实验兔进行多次免疫处理
B．可用 PEG 处理已免疫的 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞，促使二者融合
C．经选择培养后的杂交瘤细胞在体外扩大培养可以获得大量 mAb
D．该诊断试剂盒利用了 mAb 与 CiMV 的 485aa 特异性结合的原理
15．利用农杆菌转化法可将抗虫基因导入玉米细胞而获得抗虫植株。下列说法正确的是
A．若对已知序列的抗虫基因进行大量扩增，应用PCR技术
B．将重组的农杆菌Ti质粒喷洒到玉米伤口上，可成功转化
C．利用害虫接种实验可从分子水平检测目的基因是否进入了玉米细胞
D．将抗虫基因导入细胞质可避免通过花粉传播进入其他植物
16．科学家将鼠抗人大肠癌单克隆抗体基因（ND-1） 与酵母胞嘧啶脱氨酶基因（CD） 融合，在大肠杆菌中成功地表达了单链抗体与酶的融合蛋白，这类蛋白的疗法称为由抗体介导的酶解前药疗法 （ADEPT）。ND-1—CD融合基因的构建方法如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A．图中两条杂交链的获得至少需要经过2次扩增循环
B．图中杂交链延伸生成ND-1——CD 融合基因的过程应不用加入引物
C．获得的融合基因在构建好基因表达载体后可直接被正常状态的大肠杆菌吸收
D．该融合蛋白应是利用抗体部分特异性的识别人大肠癌细胞并将酶带到靶部位
三、非选择题
17．下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。
成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示剂 琼脂
含量（g） 10．0 5．0 5．0 2．0 0．2 12．0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到 1 000 mL
(1)若根据用途划分，该培养基属于 培养基。制备固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、 ；培养基中蛋白胨的作用主要是为微生物生长提供 等营养物质。
(2)在微生物培养的过程中，为防止杂菌污染，需要对培养基和培养皿进行 ；操作者的双手需要进行清洗和 。
(3)图中图 1 和图 2 是培养某细菌的结果图，其对应的接种方法分别是： 和 ，这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的 。
(4)以下过程中所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有 。
A．制作果酒 B．由果酒制作果醋
C．制作泡菜 D．制作腐乳
18．HER2 是一种定位于细胞膜上的表皮生长因子受体，HER2 过度表达与恶性肿瘤的发生及发展密切相关。为开发用于治疗 HER2 过度表达的恶性肿瘤单克隆抗体偶联药物（抗 HER2-ADC），科研人员开展了相关研究，实验流程如图1所示。回答下列问题：
(1)在制备抗 HER2-ADC的过程中，需要用 对小鼠多次进行免疫，以期获得相应的B淋巴细胞。过程②和③分别表示筛选出 、 。
(2)抗 HER2-ADC作为靶向药杀伤HER2 过度表达的恶性肿瘤细胞的效果较为明显，其原因是 。
(3)为研究抗 HER2-ADC 对 HER2 过度表达的胃癌细胞代谢的影响，科研人员选取人乳腺癌细胞BT-474、裸鼠（先天性胸腺缺陷的突变小鼠）、多种化疗药物和试剂（磷酸缓冲液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗——美坦新联药物、磷酸缓冲液等）进行了相关实验。
①将乳腺癌细胞 BT-474移植到裸鼠体内，待肿瘤体积达到 200 mm3时将裸鼠分为4组并分别给药处理，空白对照组的给药处理是注射 ，一段时间后检测裸鼠体内肿瘤的体积，结果如图2所示。
②实验结果表明，抗 HER2-ADC 对 BT-474 细胞的凋亡具有促进作用，且效果较其他药物更好。
③后续可通过研究抗 HER2-ADC 等情况，为抗 HER2-ADC 进入临床实验奠定数据基础。
19．线粒体中某基因突变可引发莱氏综合征（Leigh Syndrome）。医学工作者用来自卵子捐献者的健康线粒体取代了母亲卵子中的缺陷线粒体，随后用父亲的精子使融合后的卵子受精，诞生出世界首位“三亲婴儿”。下图为“三亲婴儿”技术路线示意图，回答下列问题：

(1)该技术涉及 等操作（至少答两项）。
(2)在促使捐献者及母亲超数排卵时，不宜长期过量使用性激素的原因是 。
(3)图示重组卵母细胞应培养至 （时期），才具备与精子受精的能力，人工授精前需对精子进行 处理。
(4)“三亲婴儿”技术被认为可能有助于治疗某些不明原因的不孕不育症，并提高体外受精的成功率。医学工作者提出另一种“三亲婴儿”的技术路线：先 ，然后将其细胞核转移到另一个细胞核已提前被移除的受精卵中。这样的受精卵也有三个遗传学亲本，并且不携带母亲的致病线粒体DNA。
20．淀粉液化是淀粉加工业中的一个重要工艺，传统的方法是加入外源耐高温α淀粉酶，工艺复杂且成本较高。现通过基因工程技术将地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因转入马铃薯，直接获得含有耐高温α淀粉酶的淀粉类原料，从而简化工艺，降低成本。回答下列问题：
(1)筛选具有耐高温α-淀粉酶基因的地衣芽孢杆菌，可将菌种接种至富含淀粉的LB培养基，在 条件下培养一段时间，向培养基表面滴加碘液，选取透明圈较大的菌落。
(2)图1为耐高温α-淀粉酶基因，请根据图中给出的部分碱基序列设计PCR扩增该基因的引物，引物序列分别为 、 （标明3'端和5'端）。除引物、耐高温的DNA聚合酶等，PCR的缓冲溶液中一般要添加Mg2+，其作用是 。
(3)将目的基因导入马铃薯可用农杆菌转化法，图2为构建表达载体所用Ti质粒，根据基因表达载体的结构组成分析，“X”应为 。目的基因应插入Ti质粒的 ，因为 。
21．通过基因工程技术由大肠杆菌合成的人生长激素可用于治疗缺乏生长激素的垂体性侏儒症病人。如图1为通过基因工程技术生产人生长激素的过程。请回答下列问题：
(1)图1中①过程中可从人的垂体细胞中提取到生长激素mRNA的原因是 ，②过程为 ，该过程存在的碱基互补配对方式有 （填序号：a.A—T；b.U—A；c.G—C）。
(2)图1中的A为生长激素基因，利用PCR将一个A扩增3次，共需要引物 个。PCR扩增后的产物可采用 法来鉴定。
(3)⑤过程可以先用 处理大肠杆菌，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的状态。
(4)图2为图1中B的结构示意图，由图2分析可知，若要成功构建基因表达载体，需要在A的上游和下游分别添加 、 （选填图2中限制酶）的识别位点（假设A的内部不存在相关限制酶的识别位点）。
试卷第1页，共3页
试卷第1页，共3页
参考答案：
1．B
【分析】果酒制作过程中的相关实验操作：
(1)材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄进行冲洗，除去枝梗。
(2)灭菌：①榨汁机要清洗干净，并晾干。②发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒。
(3)榨汁：将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁。
(4)发酵：将葡萄汁装入发酵瓶，要留要大约1/3的空间，并封闭充气口。制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在18℃~25℃，时间控制在10~12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行及时的监测。
【详解】A、用于自然发酵酿酒法的葡萄不能去皮，因为皮上有野生型酵母菌，A错误；
B、葡萄汁中加入的“曲蘖”含有酵母菌，可加快酒精发酵，B正确；
C、酿造葡萄酒需使用密闭性较好的容器，但不能打开盖子放气，防止杂菌污染，C错误；
D、酒变酸，可能是容器密闭不严醋酸菌进行了有氧呼吸，D错误。
故选B。
2．C
【分析】由图可知，①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③④是进行平板划线。
【详解】A、接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤④中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，完成步骤④共需灼烧接种环6次，A错误；
B、以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基中加入尿素的目的是提供氮源，加入酚红的目的是检测尿素分解后形成的碱性环境，B错误；
C、该接种方法为平板划线法，可用于获得酵母菌的单菌落，经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物，C正确；
D、接种后，待菌液被培养基吸收，将④倒置培养（避免水分过快蒸发和冷凝水污染培养基），皿底上标注菌种及接种日期等信息，D错误。
故选C。
3．C
【分析】稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数为30-300的平板进行计数。样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目。
【详解】A、在同一稀释度下、应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值，减少实验误差，A正确；
B、据图可知，将10g土样加入到90mL无菌水中定容至100mL后，此时锥形瓶中的稀释倍数为10倍，再经3次10倍稀释得到3号试管中的样品，故3号试管中样品的稀释倍数是104倍，B正确；
C、5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(168+175+167) ÷3÷0.1×106=1.7×109个，C错误；
D、要判断选择培养基是否起到选择作用，需设置接种了的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，若牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落种类数目多于选择培养基上的菌落，说明选择培养基有选择作用，D正确。
故选C。
4．C
【分析】植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用比例对植物细胞发育的影响：生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成。比值适中时，促进愈伤组织的形成。
【详解】A、琼脂是凝固剂，不提供营养，A错误；
B、外植体脱分化可以形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，B错误；
C、间歇摆动提高培养液溶氧量，有利于组培苗进行有氧呼吸，有氧呼吸能为组培苗的生长发育提供能量，因此可以提高生长速度，C正确；
D、植物组织培养是在无菌条件下进行的，经过间歇浸没培养获得的植株不需要消毒处理，D错误。
故选C。
5．D
【分析】动物细胞培养时提供提供CO2气体是为了维持培养液的pH；为了减少细胞代谢产物积累，补充细胞消耗的营养物质要定期更换培养液。动物细胞培养过程中使用抗生素处理可以防止杂菌污染。
【详解】A、秋水仙素可抑制分裂前期纺锤体的形成，使细胞不能分裂导致染色体数目加倍，此时细胞中染色体形态稳定、数目清晰，有利于进行染色体分析，A正确；
B、细胞在低渗溶液中会吸水，故实验中低渗处理的目的是使细胞吸水膨胀，使染色体分散开，便于观察，B正确；
C、细胞培养过程中需适时更换培养液，防止代谢产物积累过多危害细胞生长，同时也能保证营养供应，C正确；
D、利用该技术能够检测唐氏综合征等染色体异常遗传病，不能够检测镰状细胞贫血，因为镰状细胞贫血是基因突变导致的，D错误。
故选D。
6．A
【分析】1、单克隆抗体制备的细胞来源：（1）B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；（2）骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。
2、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。
3、两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。
4、单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强、灵敏度高，与抗癌药物结合可制成“生物导弹”，直接作用于癌细胞。
5、生物导弹：单克隆抗体+放射性同位素、化学药物或细胞毒素（借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞。疗效高，副作用小，位置准确）。
【详解】A、使用灭活的病毒诱导细胞融合是诱导动物细胞融合特有的方法，不可以用于诱导植物体细胞融合，A错误；
B、HAT培养基会抑制单个的骨髓瘤细胞和骨髓瘤-骨髓瘤细胞的增殖，而B淋巴细胞分裂能力弱，只有杂交瘤细胞可以正常增殖，从而筛选出杂交瘤细胞，B正确；
C、结合图中信息可知，该双特异性抗体可同时识别肝癌细胞膜上的GPC-3和T淋巴细胞膜上的CD3，从而将肝癌细胞和T淋巴细胞紧密接近，即将T细胞定向带到癌细胞所在的位置，有利于T淋巴细胞特异性地杀伤肝癌细胞，促使巨噬细胞吞噬肝癌细胞，C正确；
D、细胞培养时，除必须保证环境是无菌、无毒外，还必须定期更换培养液，提供的气体环境应为95%的空气和5%的CO2，O2是细胞代谢所必需的， CO2主要作用是维持培养液的pH，D正确。
故选A。
7．D
【分析】1、胚胎干细胞（简称ES细胞）存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。
2、当卵裂产生的子细胞逐渐形成致密的细胞团，形似桑葚时，这时的胚胎称为桑葚胚。桑椹胚进一步发育，细胞开始出现分化。聚集在胚胎一端， 个体较大的细胞， 称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织，而沿透明带内壁扩展和排列的、个体较小的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发有成胎膜和胎盘。
【详解】A、胚胎干细胞存在于早期胚胎中，具有发育的全能性，有形成个体的潜能，A正确；
B、胚胎干细胞(ES)存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能，所以供体ES在受体胚胎内可分化出成体干细胞，B正确；
C、诱导多能干细胞类似胚胎干细胞，所以诱导多能干细胞可作为供体ES的“替代品”培育嵌合体，C正确；
D、受体胚胎接受移植的最佳时机是发育至桑葚胚或囊胚阶段，D错误。
故选D。
8．B
【分析】基因工程的原理是基因重组，需要的工具有限制酶、DNA连接酶和运载体。
【详解】A、基因工程可以定向改造生物的性状，培育新品种，A正确；
B、质粒是存在于细菌和酵母菌等生物细胞中的一种环状DNA分子，不是细胞器，B错误；
C、所有生物共用一套密码子是细菌细胞内的基因可在植物细胞内表达的原因，C正确；
D、对于基因工程或分子生物学实验室向外排放转基因细菌等必须严加管制，避免污染环境，D正确。
故选B。
9．C
【分析】DNA的鉴定：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
DNA不容易酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离。
【详解】A、通过分析可知，DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精，可以用冷酒精析出上清液中的DNA，A正确；
B、DNA能溶于2mol/L的NaCl溶液，这样可以去除DNA中的某些杂质，提取的DNA可用二苯胺试剂在沸水加热条件下生成蓝色，B正确；
C、限制性酶Ⅰ和限制性酶Ⅱ处理提取的产物，只得到一条带，说明提取物是环状DNA，即提取物为质粒，C错误；
D、用琼脂糖凝胶电泳鉴定质粒，被染色的质粒还需要通过紫外灯照射才能看到结果，D正确。
故选C。
【点睛】
10．A
【分析】 艾滋病（AIDS）是一种危害性极大的传染病，由感染艾滋病病毒（HIV）引起，HIV是一种能攻击人体免疫系统的病毒。它把人体免疫系统中最重要的辅助性T细胞作为主要攻击目标，大量破坏该细胞，使人体丧失免疫功能。
【详解】A、env蛋白是介导HIV侵染靶细胞的重要蛋白，通过观察加入抑制剂后含有env基因的细胞与HIV靶细胞的融合情况，可以得出抑制剂的效果，A正确；
B、进入抑制剂通过抑制HIV与靶细胞的识别和融合过程，阻止HIV侵染，B错误；
C、进入抑制剂抑制的是两个细胞的融合情况，不影响env基因表达，不能通过测定融合细胞中env表达量判定进入抑制剂的效果，C错误；
D、进行上述系统操作并没有接触到完整的病毒，没有感染HIV的风险，D错误。
故选A。
11．A
【分析】PCR利用了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合。DNA具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下，这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动，这个过程就是电泳。PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关。
【详解】A、PCR扩增过程不需要解旋酶，是在高温下解旋的，A错误；
B、PCR过程中，在引物作用下，耐高温的DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的，B正确；
C、甲同学的电泳条带比乙同学条带宽，说明甲同学扩增的DNA产物多于乙同学，C正确；
D、由图可知，丙同学扩增出来的产物与甲乙同学产物不同，其DNA不同，其碱基序列可能不同，故丙同学所用的引物可能与甲乙同学的不一样，D正确。
故选A。
12．D
【分析】限制性核酸内切酶（限制酶）主要是从原核生物中分离纯化出来的；自然界中限制酶的天然作用是破环外来基因；限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端；限制酶本身的合成是受基因控制的，因为限制酶是蛋白质，基因指导蛋白质的合成。
【详解】A、重组 DNA 技术所用的工具酶是限制酶、DNA 连接酶，运载体不是酶，A错误；
B、不同种限制酶切割DNA产生的黏性末端也可能互补，B错误；
C、由于目的基因内部含有SmaI的切割位点，故不能使用SmaI切割目的基因，C错误；
D、使用EcoRI同时处理质粒和外源DNA，可能会发生质粒或者目的基因的自身环化，故可用两种限制酶切割质粒和外源DNA，防止自身环化，D正确。
故选D。
13．ACD
【分析】微生物常见的接种的方法：
（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、自生固氮菌是需氧型生物，步骤①土样应取自表层的土壤，步骤③中的稀释梯度分别为10，100，1000倍，所以土壤悬浮液稀释了1000倍，A正确；
B、自生固氮菌是异养型生物，可用血细胞计数板或稀释涂布平板法来计数土壤悬浮液中的菌体数，B错误；
C、步骤②需充分振荡20 min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中，C正确；
D、根据培养基中菌落的分布特点可知，步骤④为稀释涂布平板法接种，所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源，利用的是空气中的氮气，D正确。
故选ACD。
14．ABD
【分析】1、单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
2、单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点。②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。
【详解】A、制备mAb过程中，需用CiMV的485aa对实验兔进行多次免疫处理，得到产生特异性抗体的B淋巴细胞，A正确；
B、PEG促融法可以促使PEG处理已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，B正确；
C、经选择培养后的杂交瘤细胞在体外扩大培养或注射到兔腹腔内增殖均可以获得大量 mAb，C错误；
D、该诊断试剂盒利用了mAb与CiMV的485aa 特异性结合的原理，具有准确、高效、简易、快速的优点，D正确。
故选ABD。
15．AD
【分析】农杆菌转化法（约80%的转基因植物都是用这种方法获得的）：
①农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。
②转化：目的基因插入Ti质粒的T-DNA上进入农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。
【详解】A、PCR技术是体外复制特定目的基因片段的技术，若对已知序列的抗虫基因进行大量扩增，应用PCR技术，A正确；
B、将重组的农杆菌Ti质粒导入农杆菌，再用农杆菌去侵染玉米才可能成功转化，B错误；
C、利用害虫接种实验可从个体水平检测目的基因是否进入了玉米细胞，C错误；
D、将抗虫基因导入细胞质可避免通过花粉传播进入其他植物，导致基因污染，D正确。
故选AD。
【点睛】本题考查基因工程的相关知识，解题关键是识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确判断各选项。
16．ABD
【分析】PCR技术：
（1）定义：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；
（2）原理：DNA复制；
（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成引物；
（4）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶、能量；
（5）过程：高温变性，DNA双链解旋；低温复性，引物与互补链DNA结合；中温延伸，在耐高温的DNA聚合酶作用下合成子链。
【详解】A、经过一次循环得到的杂交链，引物2端和引物3端都为相应链的5 '端，不可直接延伸子链，为了使杂交链顺利延伸子链，至少需要经过2次循环才能得到如图所示的引物2端和引物3端都为相应链的3 '端杂交链，A正确；
B、杂交链延伸生成ND-1——CD 融合基因的过程中，不需要加入引物，两条母链的起始位置的碱基序列即为引物，可以作为子链合成的引物，为DNA聚合酶提供3'端，B正确；
C、需要利用氯化钙处理大肠杆菌获得感受态细胞，获得的融合基因在构建好基因表达载体才能更好的被大肠杆菌吸收，C错误；
D、抗体可以特异性识别抗原成分，故该融合蛋白应是利用抗体部分特异性的识别人大肠癌细胞并将酶带到靶部位，D正确。
故选ABD。
17．(1) 鉴别 倒平板 氮源和维生素
(2) 灭菌 消毒
(3) 稀释涂布平板法 平板划线法 菌落
(4)BC
【分析】1、选择培养基是将允许特定种类的微生物生长、同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基；鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物的培养基。
2、接种微生物常用的接种方法由平板划线法和稀释涂布平板法两种接种方法。后者可以用来计数。由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上显示的只是一个菌落，故统计的菌落常常比活菌的实际数目少，在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征，故可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物。
【详解】（1）分析表格可知，该培养基加入了指示剂，属于鉴别培养基，制备固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板；培养基中蛋白胨可以为微生物的生长主要提供氮源和维生素等。
（2）在微生物培养的过程中，无菌技术是获得纯净培养物的关键，为防止杂菌污染，需要对培养基和培养皿进行严格灭菌；同时，操作者的双手需要进行清洗和消毒。
（3）图1和图2是培养大肠杆菌的结果图，图1所示接种方法为稀释涂布平板法，图2所示接种方法为平板划线法，这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的菌落，根据菌落的特点可对微生物的种类进行判断。
（4）A、制作果酒所用的菌种是酵母菌，酵母菌是真核生物，与大肠杆菌在细胞结构上有明显的差异，A错误；
B、由果酒制作果醋所用的菌种是醋酸菌，醋酸菌和大肠杆菌一样属于原核生物，细胞结构中没有真正的细胞核，与题意相符，B正确；
C、制作泡菜所用的菌种为乳酸菌，乳酸菌与大肠杆菌都属于原核生物，细胞结构相似，与题意相符，C正确；
D、制作腐乳所用的主要菌种为毛霉，毛霉属于真核生物，与大肠杆菌在结构上有明显的不同，D错误。
故选BC。
18．(1) HER2 杂交瘤细胞 分泌抗 HER2 抗体的杂交瘤细胞
(2)HER2过度表达的恶性肿瘤细胞表面的 HER2 多，与抗 HER2-ADC 结合的概率高
(3) 等剂量的磷酸缓冲液 在动物体内的代谢、对正常细胞的毒性
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】（1）特定抗原刺激后可获得产生对应抗体的B淋巴细胞，结合题干，在制备抗 HER2-ADC的过程中，需要用 HER2 对小鼠多次进行免疫，获得分泌抗 HER2抗体的B淋巴细胞；过程②为特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞（该培养基上未融合细胞的和同种融合的细胞都死亡），过程③为抗体检测，目的是筛选产生特定抗体（分泌抗 HER2 抗体）的杂交瘤细胞。
（2）正常细胞和 HER2 过度表达的恶性肿瘤细胞都能产生 HER2，但是 HER2过度表达的恶性肿瘤细胞表面的 HER2 多，与抗HER2-ADC 结合的概率高，因而抗 HER2-ADC可作为靶向药杀伤 HER2 过度表达的恶性肿瘤细胞。
（3）①HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗—美坦新联药物都是治疗癌细胞的药物，根据实验设计的对照原则与单一变量原则可知，空白对照组应注射等剂量的磷酸缓冲液。
②根据实验结果可知，抗 HER2-ADC 组裸鼠的肿瘤体积最小，且比初始肿瘤体积小，说明抗 HER2-ADC 对 BT-474 细胞的凋亡具有促进作用，且效果较其他药物更好。
③实验仅研究了抗 HER2-ADC 对肿瘤细胞代谢的影响，后续可通过研究抗 HER2-ADC在动物体内的代谢、对正常细胞的毒性等情况，为抗 HER2-ADC进入临床实验奠定数据基础。
19．(1)动物细胞培养、动物细胞核移植、胚胎移植、早期胚胎培养等
(2)长期过量使用的性激素会通过负反馈调节，导致性腺萎缩
(3) MII 获能
(4)先让父母双方的生殖细胞完成受精过程，产生受精卵
【分析】据图分析：图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了核移植技术、体外受精技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。所得三亲婴儿细胞的细胞质来自健康的捐献者，细胞核基因一半来自母亲，一半来自父亲，所以三亲婴儿融合了三亲的遗传物质。
【详解】（1）该技术涉及核移植技术、体外受精技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技等操作。
（2）性激素的合成受下丘脑-垂体-性腺轴的调节，通过长期过量使用性激素刺激母体，性激素会通过负反馈调节抑制垂体功能，导致性腺萎缩。
（3）卵母细胞要处于MII才具备受精能力，所以重组卵母细胞应培养至MII期。精子要经过获能处理才具备受精能力，所以人工授精前要对精子进行获能处理。
（4）可以先形成受精卵后再对受精卵的核进行移植，也能达到同样的目的。
20．(1)高温
(2) 5'ATCCGTGGCTG3' 5'CTACGGATTCA3' 激活DNA聚合酶
(3) 启动子 T-DNA T-DNA可转移到受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上。
【分析】PCR是聚合酶链式反应的简称，指在引物指导下由酶催化的对特定模板（克隆或基因组DNA）的扩增反应，是模拟体内DNA复制过程，在体外特异性扩增DNA片段的一种技术。
【详解】（1）地衣芽孢杆菌具有耐高温的特点，因此可将菌种接种至富含淀粉的LB培养基，在高温条件下培养一段时间。
（2） 引物的方向应该与模版反向，而且碱基互补配对。引物 3’延伸应该扩增目的基因，因此引物序列分别为5'TAGGCACCGAC3'、5'GATGCCTAAGT3'。除引物、耐高温的DNA聚合酶等，PCR的缓冲溶液中一般要添加Mg2+，其作用是激活DNA聚合酶。
（3）基因表达载体上应具备的元件有复制原点、启动子、终止子、目的基因、标记基因等，因此X为启动子。T-DNA可转移到受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上，因此目的基因应插入Ti质粒的T-DNA上。
21．(1) 人的生长激素基因在垂体细胞中选择性表达 逆转录 abc
(2) 14 琼脂糖凝胶电泳
(3)Ca2+
(4) Alu I Hind Ⅱ
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】（1）人的生长激素基因在垂体细胞中选择性表达，故在人的垂体细胞中可以提取生长激素mRNA。②过程是以mRNA为模板合成DNA的过程，为逆转录，该过程存在的碱基互补配对方式有A-T，U-A，G-C，即abc。
（2）图1中的A为生长激素基因，利用PCR扩增时需要2种引物，若将一个生长激素基因扩增3次，共得到8=23个DNA，新合成的子链均需要含有引物，共需要引物2×8－2（两条母链）＝14（个），PCR扩增后的产物可以用琼脂糖凝胶电泳法来鉴定。
（3）⑤过程为将重组的表达载体导入大肠杆菌细胞，可用Ca2+处理大肠杆菌，使大肠杆菌处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。
（4）基因表达载体上除目的基因外，还需要有启动子、终止子、复制原点和标记基因。由题图2可知BamH Ⅰ会破坏标记基因、EcoR Ⅰ会破坏复制原点，故不选用此两种限制酶，结合启动子启动的转录方向，为保证目的基因的正确连接与转录，应在目的基因的上游添加AluⅠ的识别位点、下游添加Hind Ⅱ的识别位点。
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