江苏省徐州市沛县2023-2024高二下学期4月期中生物试题（含解析）

江苏省徐州市沛县2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1．下列关于实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作说法正确的是（ ）
A．培养酵母菌的试剂和器具都要进行湿热灭菌
B．配制培养基、倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行
C．倒好的平板要立即使用，以免表面干燥，影响酵母菌生长
D．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线
2．某生物兴趣小组的同学利用图示装置进行果酒和果醋的制作，下列相关叙述正确的是（ ）
A．乙酸发酵期间，关闭阀a和阀b，避免空气的进入
B．新鲜葡萄冲洗、晾干、榨汁、灭菌后装入发酵瓶
C．酒精发酵期间，开启磁力搅拌器来提高发酵液中的溶解氧
D．果酒制作过程中，酵母菌进行了有氧呼吸和无氧呼吸
3．下列有关微生物的培养与应用的叙述，正确的是（ ）
A．湿热灭菌后倒的平板需倒置，接种后的平板可以不倒置
B．同一稀释度下涂布一个平板即可，待菌落数稳定后计数
C．将未接种的平板培养并观察有无菌落，以判断培养基灭菌是否合格
D．纤维素分解菌鉴定时，在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红则能初步鉴定
4．如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1、2、3、4、5。下列相关叙述错误的是（ ）
A．第1区和第5区的划线不能相连
B．划线操作时完全打开皿盖，划完立即盖上
C．在五个区域中划线前后都要对接种环进行灭菌
D．接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的
5．利用胡萝卜根段培养获得试管苗的过程如下图。下列相关叙述错误的是（ ）
A．对试管苗炼苗（驯化）的操作步骤之一是用流水除去根部培养基
B．步骤②消毒一般是先用70%酒精浸泡10min，再用无菌水冲洗2~3次
C．步骤③切取的组织块中需带有形成层，原因是其分裂旺盛易脱分化
D．步骤⑤和步骤⑥所用培养基中生长素和细胞分裂素相对含量不同
6．细胞融合技术在生物育种和免疫学中有着广泛应用，下图为细胞融合的简略过程，据下图分析，下列相关叙述正确的是（ ）
A．形成乙所依赖的生物学原理为细胞膜的流动性和植物细胞的全能性
B．甲中a和b在体外受精前，需在体外进行卵子的成熟培养和精子获得能量的处理
C．若a和b分别为基因型AaBB、aaBb个体所产生的花粉细胞，则c有4种基因型
D．对于已形成的细胞d，利用选择培养基筛选杂交瘤细胞即可大规模生产单克隆抗体丙
7．下列关于哺乳动物胚胎工程和细胞工程的叙述，错误的是（ ）
A．猴的核移植细胞通过胚胎工程已成功地培育出了克隆猴
B．早期胚胎需移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育成个体
C．培养动物细胞的培养液需要定期更换，防止细胞代谢物积累对细胞造成危害
D．进行胚胎移植前，要对供体和受体进行免疫检查，以防止发生免疫排斥反应
8．科研人员用小鼠胚胎干细胞（mESCs）构建“体外卵巢”。该卵巢中的卵子受精后产生了健康、有生育能力的后代，基本过程如下图。下列相关叙述正确的是（ ）

A．过程①细胞内存在基因的选择性表达
B．过程②用灭活的病毒诱导两种细胞融合
C．该研究结果说明小鼠的胚胎干细胞具有全能性
D．后代小鼠的遗传物质仅仅来自亲代小鼠胚胎干细胞
9．狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉且其细胞中的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松的扩大培养具体过程如图所示（其中数字序号代表相应处理过程）。下列有关分析正确的有（ ）
A．过程③先在生长素/细胞分裂素的值高的培养基中培养，再转移至其值低的培养基中
B．制备培养基的正确顺序是：称量→溶解→定容→调pH值→分装→灭菌
C．过程④常用射线或化学物质处理即可获得大量所需的突变体植株丙
D．过程⑥利用愈伤组织分裂能力强、全能性高的特点可大量获得黄酮类化合物
10．大肠杆菌是基因工程技术中被广泛采用的工具，人生长激素的基因工程过程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．经①获得该mRNA的最佳材料是受精卵
B．通过①②过程，可以构建基因组文库
C．要检测③⑥过程的产物可分别用PCR技术和抗原—抗体杂交技术
D．⑤过程要在低温和较高浓度的氯化钙溶液中处理使重组DNA易进入受体细胞
11．基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速，如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列相关叙述正确的是（ ）
A．导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是乳腺细胞
B．扩增目的基因时，利用耐高温的DNA连接酶从引物a、b的3’-端进行子链合成
C．若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列
D．利用显微注射法可将含有目的基因的重组质粒整合到植物受体细胞的染色体DNA上
12．科学家利用基因工程将编码天然蜘蛛丝蛋白的基因导入家蚕，生产出一种特殊的复合纤维蛋白，该复合纤维蛋白的韧性优于天然蚕丝蛋白。下列相关叙述错误的是（ ）
A．该蛋白的肽链由氨基酸通过氢键连接而成
B．加热变性的蛋白质不能恢复原有的结构和性质
C．该蛋白的特定结构决定其韧性优于天然蚕丝蛋白
D．该蛋白与天然蜘蛛丝蛋白的基本组成单位都是氨基酸
13．图甲、乙中标注了相关限制酶的酶切位点。下列关于培育转基因大肠杆菌的叙述正确的是（ ）

A．若通过PCR获取该目的基因，应该选用引物甲和引物丙
B．图中质粒和目的基因构建表达载体，可选用BamHI和HindⅢ剪切
C．若将基因表达载体导入受体细胞中，需选用农杆菌转化法
D．在受体细胞中，氨苄青霉素抗性基因和目的基因可同时表达
14．下列关于生物技术的安全性及伦理问题的观点，正确的是（ ）
A．生物武器具有传染性强、作用范围广等特点，应严格禁止
B．放宽转基因植物限制，尽可能多的种植转基因植物，提高经济效益
C．当今社会的普遍观点是禁止一切克隆实验，包括治疗性克隆和克隆人
D．反对设计试管婴儿的原因之一是因为试管婴儿技术属于无性繁殖方式
二、多选题
15．科研人员将酿酒酵母质粒上的丙酮酸脱氢酶基因（PD）替换为植物乳杆菌中的乳酸脱氢酶基因（L-PG），可获得乳酸乙酯（白酒香味的主要来源）高产菌株，过程如图。下列分析合理的是（ ）
A．转入的L-PG基因表达产物将影响酿酒酵母的活性
B．L-PG基因替换质粒上的PD基因是通过同源重组实现的
C．标记基因Ampr可检测是否成功构建乳酸乙酯高产菌株
D．可以利用PCR技术筛选含有L-PG基因的受体细胞
16．6-磷酸葡萄糖脱氢酶（C-6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。基因型为XFXS的女性体细胞中的两个X染色体，会有一个随机失活。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理后先进行细胞的原代培养，再对不同的细胞分别进行单克隆培养。分别对原代培养和单克隆培养的细胞进行G-6PD蛋白电泳检测，结果如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）

A．该过程用到的主要细胞工程技术是动物细胞培养
B．用胰蛋白酶处理皮肤组织可使其分散成单个细胞
C．单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因不同
D．原代培养细胞电泳图有2个条带是因为细胞中两个染色体都有活性
17．为研究多种血糖调节因子的作用，我国科学家开发出胰岛素抵抗模型鼠。为扩增模型鼠数量，科学家通过诱导优良模型鼠体细胞转化获得诱导胚胎干细胞（iPS细胞），继而利用iPS细胞培育出与模型鼠遗传特性相同的克隆鼠，具体步骤如下图所示。下列相关叙述正确的是（ ）

A．胚胎移植后，重构胚进一步扩大导致囊胚腔破裂的过程称为孵化
B．为确定克隆鼠培育是否成功，须对黑色鼠3进行胰岛素抵抗的相关检测
C．诱导优良模型鼠体细胞转化为iPS细胞的过程类似于植物组织培养的脱分化
D．为获得更多的双细胞胚，可对白色鼠1注射雌激素达到超数排卵的目的
18．为了从土壤中筛选对抗生素有抗性、能高效降解淀粉的微生物，研究人员利用土壤浸出液进行了如图所示操作。下列相关叙述错误的是（ ）
A．在X培养基上接种的方法为平板划线法
B．X培养基含有淀粉和抗生素，Y培养基是含琼脂的培养基
C．菌落①可能是硝化细菌，因不能产生淀粉酶所以无透明圈
D．图中降解淀粉最高效的是菌落⑤，可根据菌落特征初步判断微生物类型
三、非选择题
19．为提高作物产量，种植业往往使用大量的氮素化肥，既增加了生产成本，又易造成环境污染。自生固氮菌营独立生活，为改变这种现状带来了希望。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图。回答下列问题：
(1)步骤①土样应取自表层土壤的原因是 。步骤③中需用手指轻压移液管 上的橡皮头，吹吸3次的作用是 。步骤④所用的接种工具是
(2)下表为两种培养基的配方，步骤④应选其中的培养基 。
培养基类型 培养基组分
培养基甲 甘露醇、KH2PO4、MgSO4·7H2O、NaCl、K2SO4、CaCO3、蒸馏水
培养基乙 甘露醇、KH2PO4、MgSO4·7H2O、NaCl、K2SO4、CaCO3、蒸馏水、琼脂
(3)若在④的平板上统计出菌落的平均数量为130个，则每克土壤中含有的固氮菌为 个。
(4)将纯化的固氮菌置于完全培养液中扩大培养48h，经离心后收集下层细胞并转移至特定培养基中进行固氮能力的测定，筛选出固氮能力最强的菌种CM12，为进一步鉴定其固氮能力，科研人员选用发芽一致的玉米种子进行3组盆栽实验，30d后测定土壤微生物有机氮含量，结果如下图。
N：尿素处理组[每盆土壤浇灌50mL有氮全营养液（在1000mL无氮植物营养液中加入0.12g尿素）]；
CM12：自生固氮菌CM12处理组（每盆土壤浇灌50mL接种自固氮菌的无氮植物营养液）①对照组（CK）的处理为
②实验结果表明，用尿素处理和接种固氮菌CM12处理均能显著增加土壤微生物有机氮含量。与尿素处理组相比，CM12处理组土壤微生物有机氮含量增加了约 %。
③自生固氮菌较共生固氮菌（如根瘤菌）的应用范围更广，原因是 。
20．Bad基因编码204个氨基酸，是Bel2（B细胞淋巴瘤/白血病-2）家族中相关的促凋亡基因。下图为科研人员获得Bad基因重组细菌的主要流程。请回答：

(1)构建Bad基因的克隆时，基因组DNA不能直接用作PCR扩增的模板，原因是真核生物基因组中存在 序列，在形成mRNA的剪接加工过程中被切除。从细胞中提取总RNA或mRNA，在 的引导下使用逆转录酶来合成cDNA链。
(2)引物设计的质量是决定图中“②PCR”成败的关键因素。首先从核酸数据库中获得mBad基因的编码序列，然后在引物的 端加上不同的限制酶切位点序列，第三步为了保证抗原标签与mBad基因表达产物中氨基酸顺序正确，有时需要补加核苷酸，但是注意不能产生 ，否则会导致蛋End白质分子量的减小。
(3)如图为②PCR过程的程序参数。②过程PCR反应体系配制完成后，先在冰上预冷，等程序设置完毕后再放入PCR仪中，这种冷启动法可以 。Step1和Step8的主要目的分别是 。由于Step3引物含有 ，不能和模板完全匹配，所以Step3的温度比Step6要低一点。

(4)一般而言，②过程中双链DNA分子越大则电泳迁移速率越 。除此之外，DNA分子的构型对其电泳迁移速率影响也大：环状超螺旋DNA电泳的速率一般快于线形DNA。从结构的角度分析，原因可能是 。
(5)研究人员在④过程中应优先选择 和 两种限制酶及E．colDNA连接酶形成重组质粒。
(6)筛选得到的阳性重组子细菌还需要进一步通过DNA测序，原因是 。
21．细胞工程在药物生产和育种等领域应用十分广泛。阅读下列材料，回答下列问题。
材料一：人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。如图是制备抗HCG单克隆抗体流程示意图。
材料二：西湖龙井含有的茶碱是植物细胞的代谢产物，具有提神、抗衰老功效，可利用植物组织培养技术来实现茶碱的工业化生产。
(1)免疫处理的小鼠产生相应的B淋巴细胞群能合成并分泌 （填“一种”或“多种”）抗体。步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行 及抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行：先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0．1 mL细胞稀释液，其目的是 。
(2)单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂，如科学家利用人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体，制作出了早孕试纸，该试纸可以利用尿液诊断早孕的理由是 。鼠源性单克隆抗体可应用于肿瘤的临床免疫治疗，在注射前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是降低 。
(3)若利用植物组织培养技术，可将龙井茶叶细胞培养到 阶段，然后从 （填细胞器）中提取茶碱；若要获得神奇的人工种子，可将龙井茶叶细胞培养到 ，再和具有养分的人工胚乳一起包埋在具有保护功能的人工种皮中；由其培育成的植株生殖方式为 。
(4)与常规育种相比，植物组织培养技术产生的植株特点有 。
22．近年来，我国科研 工作者在国际上首次利用体细胞成功创建克隆猕猴中 中、华华和梦梦。体细胞克隆猴的诞生，是人类认识克隆技术，研究细胞功能和治疗性克隆的里程碑式研究结果。同时，也是人类干细胞研究方兴未艾事业的一个开始。克隆上述猕猴的操作流程如图1。与此同时，我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异源二倍体胚胎干细胞（AdESCs），操作流程如图2。请回答下列问题：

(1)利用 酶处理一只流产猕猴胎儿的皮肤，获取分散的成纤维细胞，制备细胞悬液。然后放入气体条件是 的恒温箱中培养。
(2)请你推测图1中注入的神秘浓度比的药物的作用是 ，注入细胞的方法是
(3)通常情况下，卵母细胞要发育到减数第 次分裂中期时才适合核移植，早期胚胎要发育到 时才适合进行胚胎移植。
(4)我们大胆推测，通过体细胞克隆猴的研究，将来会找到让高度分化的人体细胞逆向生成 的方法，进而诱导克隆出 用于替换人体相应病变的结构
(5)图2过程涉及的现代生物技术有动物细胞培养、早期胚胎培养和 不用大鼠和小鼠直接交配制备异源二倍体胚胎干细胞的原因是二者之间存在
23．草莓常用匍匐茎进行营养繁殖，植株若感染病毒易传播给后代，病毒在作物体内积累，会导致产量降低，品质变差。科研人员通过一系列的方法、步骤，建立了草莓脱毒快速繁殖体系。
(1)外植体经过 等过程能够发育成完整植株，体现了植物细胞有 。若培育脱毒组培苗，通常选取植株分生组织（如茎尖或根尖）作为外植体的主要原因是 。
(2)在超净工作台上，先后用75%酒精和0．1%的氯化汞对草莓匍匐茎尖进行 ，每次处理后均需用 冲洗3至5次，然后接种到经 处理的培养基上。
(3)图是两种植物激素不同浓度与形成芽、根、愈伤组织的关系，其中植物激素Y属于 （生长素类、细胞分裂素类）激素。
不同植物激素浓度与芽、根、愈伤组织的关系
(4)科研人员进一步用不同浓度和比例的植物激素处理外植体，一段时间后观察结果如下表（6-BA是细胞分裂素类激素，IBA是生长素类激素）：
处理组 6-BA（ mg/L） IBA （ mg/L） 接种数（个） 萌芽率（%） 增殖系数
1 0．5 0 12 33．3 5．4
2 0．5 0．1 12 83．3 6．6
3 0．5 0．2 12 58．3 4．3
4 1．0 0 12 50．0 3．9
5 1．0 0．1 12 41．0 3．8
6 1．o 0．2 12 33．3 3．0
萌芽率（%）=草莓外植体萌芽数/草莓外植体总接种数×100%
增殖系数=草莓组培苗增殖腋芽数/草莓组培苗总接种数
从表中可以看出，处理组 草莓的萌芽率和增殖系数显著高于其他组，该组激素配比可用于草莓的快速繁殖。若将组培苗移植到大田中种植，还需要诱导 。结合图1分析，此时6-BA与IBA比值应 （大于1、等于1、小于1）。
试卷第1页，共3页
试卷第1页，共3页
参考答案：
1．D
【分析】1、灭菌常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和湿热灭菌。消毒常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。
2、平板划线操作：（1）平板划线操作的第一步之前要灼烧接种环，目的是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养基。（2）平板划线除首次划线外，每次划线前都要灼烧接种环，目的是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种。（3）平板划线结束时要灼烧接种环，其目的是避免接种环上残留的菌种污染环境和感染操作者。
【详解】A、接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理，接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基及多种器材用湿热灭菌法处理，A错误；
B、倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行，而配培养基不需要在酒精灯的火焰旁进行，因为培养基最后还需要灭菌，B错误；
C、倒好的平板需要冷却后使用，且不宜久存，以免表面干燥，影响接种后微生物的生长，C错误；
D、平板划线转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线，主要目的是杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，D正确。
故选D。
2．D
【分析】1、果酒制作的原理是利用酵母菌在无氧条件下才能进行酒精发酵产生酒精，若是在有氧条件下则进行有氧呼吸而大量繁殖。果酒发酵是在18~30°C、缺氧、呈酸性的环境中。
2、果醋的制作原理是利用醋酸菌在氧气充足的条件将乙醇先转化为乙醛，在进一步转化为醋酸。醋酸菌是好氧菌，必须生活在氧气充足的环境中，且最适生长温度是30~35°C。
【详解】A、乙酸发酵所需的菌种是需氧菌，发酵期间不能将两个阀门都关闭，A错误；
B、新鲜葡萄不能灭菌，否则会导致酵母菌死亡，从而使发酵失败，B错误；
C、酒精发酵利用的是酵母菌的无氧呼吸，不能提高溶解氧含量，C错误；
D、果酒制作过程中，酵母菌进行了有氧呼吸以增加酵母菌数量， 进行无氧呼吸进行发酵，D正确。
故选D。
3．C
【分析】1、制备培养基的步骤：计算、称量、溶化、（调节 pH）、灭菌、倒平板。
2、平板冷凝后要将平板倒置，既可防止皿盖上凝结的水滴滴入培养基造成污染，又可避免培养基表面的水分过快挥发。
3、稀释涂布平板法：用移液管和无菌水将菌液进行一系列的梯度稀释，然后用涂布器将不同稀释度的菌液分别均匀地涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。
【详解】A、平板倒置，既可防止皿盖上凝结的水滴滴入培养基造成污染，又可避免培养基表面的水分过快挥发，接种后的平板也需要倒置培养，A错误；
B、同一稀释度下至少要涂布三个平板，进行重复实验，并且要培养到菌落数稳定时计数，菌落数在30~300之间，B错误；
C、将未接种的平板培养并观察有无菌落，若未接种的培养基表面有菌落生长，则培养基灭菌不合格，若未接种的培养基表面无菌落生长，则培养基灭菌合格，C正确；
D、尿素分解菌可以产生脲酶，脲酶可以催化尿素分解为NH3，NH3呈碱性遇酚红试剂变为红色，故尿素分解菌鉴定时，在培养基中加入酚红指示剂，指示剂变红则能初步鉴定；若对纤维素分解菌鉴定时，需在培养基中加入刚果红试剂，D错误。
故选C。
4．B
【分析】平板划线的操作的基本步骤是：（1）右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将已冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰并塞上棉塞。（2）左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处将接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。（3）烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却，从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。（4）将平板倒置，放入培养箱中培养。
【详解】A、进行平板划线时，不能将第1区和第5区的划线相连，避免已分离开的菌种再次聚集，最终无法获得单菌落，A正确；
B、为避免杂菌污染，划线操作时不能将皿盖完全打开，只能打开一条缝，B错误；
C、在五个区域中划线前后都要对接种环进行灭菌，以防止杂菌污染，并保证每次划线的菌种来自上一区域的末端以及防止污染环境和操作者，C正确；
D、接种时不能划破培养基，因为划破培养基会导致菌种不容易扩散开，难以达到分离单菌落的目的，D正确。
故选B。
5．B
【分析】离体的植物组织或细胞，在培养一段时间后，会通过细胞分裂形成愈伤组织。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植物体。
【详解】A、对试管苗炼苗（驯化）的操作步骤之一是用流水除去根部培养基，将幼苗需移植到消过毒的新环境下生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中，A正确；
B、步骤②消毒方法一般是先用70%酒精浸泡10s（时间过程会伤害植物细胞），再用无菌水冲洗2～3次，B错误；
C、步骤③切取的组织块中要带有形成层，其原因是形成层有大量的纺锤状原始细胞和射线原始细胞，它们分裂迅速，组培时容易形成愈伤组织，继而获得组培苗，C正确；
D、步骤⑤（脱分化）和步骤⑥（再分化）所用培养基中生长素和细胞分裂素相对含量不同，D正确。
故选B。
6．A
【分析】据图分析，图中甲是有性杂交产生的后代，则a、b分别表示精子和卵细胞；乙是植物体细胞杂交产生的后代，则a、b表示两种植物细胞，融合前需要用酶解法去掉细胞壁；丙是单克隆抗体，则a、b表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，融合产生的杂交瘤细胞d。
【详解】A、乙是植物体细胞杂交产生的后代，细胞融合过程体现细胞膜的流动性，用杂交细胞培养出植株的过程体现植物细胞的全能性，A正确；
B、图中甲是有性杂交产生的后代试管动物，则a、b分别表示精子和卵细胞，需在体外进行卵子的成熟培养和精子获能处理（获得能力而非获得能量）才能进行体外受精，B错误；
C、若a和b分别为基因型AaBB、aaBb植株的花粉细胞，AaBB能产生AB、aB两种花粉，aaBb能产生aB、ab两种花粉，去壁两两融合可以得到AABB、aaBB、aabb、AaBB、AaBb、aaBb共6种基因型的细胞，C错误；
D、对于已融合形成的细胞d，还需要经过克隆化培养和专一抗体检验阳性的筛选，才能大规模生产单克隆抗体丙 ，D错误。
故选A。
7．D
【分析】胚胎移植的生理基础（1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境；（2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；（3）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能；（4）胚胎遗传性状不受受体任何影响。
【详解】A、成功培育克隆猴的过程涉及的生物技术有核移植技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等，A正确；
B、为了提高胚胎移植的成功率，早期胚胎需移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育成个体，B正确；
C、为防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，培养液需要定期更换，C正确；
D、子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，则不需要对供体和受体进行免疫检查，D错误。
故选D。
8．A
【分析】物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法也类似，常用的诱导因素有聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒、电激等。
【详解】A、过程①表示细胞的分裂分化，细胞分化的实质是基因的选择表达，故过程①细胞内存在基因的选择性表达，A正确；
B、过程②是胚胎性卵巢体细胞与卵母细胞结构重建的过程，该过程不需要细胞融合，B错误；
C、该研究结果利用了精卵结合形成的受精卵发育为正常小鼠，不能说明小鼠的胚胎干细胞具有全能性，C错误；
D、后代小鼠的遗传物质来自亲代小鼠胚胎干细胞和精子，D错误。
故选A。
9．B
【分析】生长素/细胞分裂素的比值高的培养基为诱导生根的培养基，由愈伤组织经脱分化诱导再生植株的过程中应先诱导发芽，再诱导生根。
【详解】A、生长素/细胞分裂素的比值高的培养基为诱导生根的培养基，由愈伤组织经脱分化诱导再生植株的过程中应先诱导发芽，再诱导生根，A错误；
B、制备培养基的正确顺序为：称量→溶解→定容→调pH值→分装→灭菌，B正确；
C、生物变异具有低频性和不定向性，因此射线或化学物质处理可以提高突变植株出现的概率，对突变植株进行选择、培养后才能获得大量所需的突变体植株丙，C错误；
D、过程⑥利用愈伤组织分裂能力强、全能性高的特点可诱导出能产生黄酮类化合物的组织细胞，对其进行细胞产物的工厂化生产即可大量获得黄酮类化合物，D错误。
故选B。
10．C
【分析】基因工程过程：
1、目的基因的提取；
2、目的基因与运载体结合；
3、目的基因导入受体细胞；
4、受体细胞内基因的表达。
【详解】A、经①获得该mRNA的最佳材料是特定的组织细胞，而不是受精卵，A错误；
B、通过①②过程得到cDNA，cDNA所含的基因不是全部基因不能构建基因组文库，B错误；
C、要检测③的产物生长激素基因可以用PCR技术扩增，要检测⑥过程的产物可用抗原—抗体杂交技术，C正确；
D、⑤过程要在低温和低渗氯化钙溶液中处理，通过增大细菌细胞壁通透性使重组DNA易进入受体细胞，D错误。
故选C。
11．C
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。
【详解】A、导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞不是乳腺细胞，而是受精卵或早期胚胎细胞，A错误；
B、在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'-端进行子链合成，B错误；
C、成熟的mRNA是由基因转录后经剪切而成，不含启动子序列，故若某基因是从人的细胞内提取 mRNA 经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列，C正确；
D、农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上，将基因转入动物细胞常用显微注射法，但显微注射法不能将含有目的基因的重组质粒整合到植物受体细胞的染色体DNA上，D错误。
故选C。
12．A
【分析】构成蛋白质的基本单位是氨基酸，每种氨基酸分子至少都含有一个氨基和一个羧基，且都有一个氨基和一个羧基连接在同一个碳原子上，这个碳原子还连接一个氢和一个R基，氨基酸的不同在于R基的不同。
【详解】A、该蛋白的肽链由氨基酸通过肽键连接而成，A错误；
B、加热破坏蛋白质的空间结构导致其变性，结构和性质改变，无法恢复，B正确；
C、蛋白质的结构决定功能，该蛋白的特定结构决定其韧性优于天然蚕丝蛋白，C正确；
D、该蛋白的基本组成单位是氨基酸，与天然蜘蛛丝蛋白的基本单位相同，D正确。
故选A。
13．A
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。
【详解】A、引物是根据目的基因两侧序列获得，需要与目的基因两端互补，故若通过PCR技术大量扩增该目的基因，应该选用引物甲和引物丙，A正确；
B、图甲中BamHⅠ会破坏两种抗性基因，不能选用，故图乙中目的基因左侧只能选BclⅠ，而质粒上没有目的基因右侧Sau3A的切点，两者都有Hind Ⅲ的切点，为了防止目的基因与质粒随意连接，故质粒和目的基因构建表达载体，应选用BclⅠ和Hind Ⅲ剪切，B错误；
C、若将基因表达载体导入受体细胞大肠杆菌（微生物细胞）时，需要用钙离子等处理，使其处于感受态，C错误；
D、在受体细胞中，插入目的基因时氨苄青霉素抗性基因被破坏，不能和目的基因同时表达，D错误。
故选A。
14．A
【分析】生物技术的安全性和伦理问题：（1）生物技术安全性问题包括食物安全、生物安全、环境安全三个方面；（2）伦理问题主要在克隆人的问题上出现争议，据此分析答题。
【详解】A、生物武器是指有意识的利用微生物、毒素、昆虫侵袭敌人的军队、人口、农作物或者牲畜等目标，以达到战争目的一类武器，有传染性强、作用范围广等特点，应严格禁止，A正确；
B、转基因植物的种植应有一定限度，不能尽可能多的种植转基因植物，以免造成基因污染和环境问题，B错误；
C、当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，反对生殖性克隆，但是不反对治疗性克隆，C错误；
D、试管婴儿技术属于有性繁殖，反对设计试管婴儿的原因之一是可能有人滥用此技术选择性设计婴儿的性别，D错误。
故选A。
15．ABD
【分析】分析题图：图示是采用基因工程技术将酿酒酵母质粒上的丙酮酸脱氢酶基因(PD)替换为植物乳杆菌中的乳酸脱氢酶基因(L-PG)，从而获得乳酸乙酯高产菌株。
【详解】A、目的基因表达产物不能影响受体细胞的生存和活性，因此转入的L-PG基因表达产物不能影响酿酒酵母活性，A正确；
B、基因工程的实质是基因重组，由图可知，通过基因工程技术实现酵母菌的PD基因被替换为L-PG基因，即L-PG基因替换质粒上的PD基因是通过同源重组实现的，B正确；
C、标记基因Ampr可筛选含有目的基因的受体细胞，但不能检测是否成功构建乳酸乙酯高产菌株，C错误；
D、PCR技术是一项体外扩增基因的技术，依据碱基互补配对原则，可以用于筛选含有L-PG基因的受体细胞，D正确。
故选ABD。
16．CD
【分析】1、动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中(原代培养)→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液(传代培养)→放入二氧化碳培养箱培养。
2、动物细胞培养是动物细胞工程技术的基础。
【详解】A、动物细胞培养是细胞工程的基础，无论是原代培养还是单克隆培养，用到的主要细胞工程技术是动物细胞培养，A正确；
B、动物细胞之间的蛋白质，被胰蛋白酶或胶原蛋白酶分解，分散成单个细胞，B正确；
C、单克隆培养的细胞，是通过有丝分裂得到的增殖的细胞，故单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7，所含基因相同，表达的基因不相同，C错误；
D、结合题干，基因型为XFXS女性体细胞中的两个X色体会有一个随机失活（不是两个染色体都有活性），故一个细胞中6-磷酸葡萄糖脱氢酶，电泳后只显示一个条带，原代培养的细胞电泳有2个条带，故同时检测了多个细胞，D错误。
故选CD。
17．BC
【分析】哺乳动物胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞；胚胎干细胞的细胞核一般较大，核仁明显，具有全能性。
【详解】A、囊胚进一步扩大，会导致透明带的破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做孵化，A错误；
B、据图示，最终得到了黑色鼠3个体，实验最终目的为“开发出胰岛素抵抗模型鼠”，故为确定克隆鼠培有是否成功，须对黑色鼠3进行胰岛素抵抗的相关检测，B正确；
C、优良模型鼠体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的脱分化过程类似，是组织细胞恢复分裂能力的过程，C正确；
D、用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，而非注射雌激素，D错误。
故选BC。
18．AB
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、根据培养后培养基上形成的菌落分布可知，将含目的菌的土壤浸出液接种在 X 培养基上采用的是稀释涂布平板法， A错误；
B、实验目的是筛选对抗生素有抗性、高效降解淀粉的微生物，根据图示中在 X培养基上滴加碘液后形成了透明圈，说明X 培养基上含有淀粉，菌体分解淀粉的能力强，在其周围形成的透明圈就大，同时为了筛选到对抗生素有抗性的菌体，因此 X 培养基还应该含有抗生素， Y 培养基是将筛选到的目的菌扩大培养，为不含琼脂的液体培养基，B错误；
C、菌落①不能降解淀粉，可能是硝化细菌，因不能产生淀粉酶所以无透明圈，C正确；
D、碘液遇淀粉会变蓝，淀粉被分解，蓝色消失，图中⑤的透明圈最大，说明菌体⑤降解淀粉的能力最强，不同菌体形成的菌落特征不同，因此可根据菌落特征初步判断微生物类型， D 正确。
故选AB。
19．(1) 在富含有机质的土壤表层，有更多的固氮菌生长（或固氮菌一般为需氧型，生活在土壤表层） 轻压 使菌种和无菌水充分混匀 涂布器
(2)乙
(3)1.3×107
(4) 每盆土壤浇50mL无氮植物营养液 120 自生固氮菌能在土壤中独立固氮，不受宿主的限制
【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因为它们来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。
【详解】（1）土壤中含有丰富微生物，同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大、种类最多，在富含有机质的土壤表层，有更多的固氮菌生长，故步骤①土样取自当地表层土壤；步骤③对菌液进行梯度稀释的过程中，用移液管取样前，需用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸3次，目的是使菌种和无菌水充分混匀；由图观察可知，实验采用的是稀释涂布平板法，所以步骤④中所用的接种工具是涂布器。
（2）由题干信息分析可知，科研人员的目的是分离土壤中自生固氮菌，故为了模拟类似的生长环境，培养基中需要添加多种无机盐来模拟土壤环境，且应为固体培养基，需要添加凝固剂如琼脂，故应选择培养基乙。
（3）由图观察可知，10g土壤加到90ml无菌水是稀释10倍，此后共稀释104倍，若在④的平板上统计的菌落的平均数量为130个，则每克土壤中含有的固氮菌为130÷0.1×104=1.3×107个。
（4）①对照组的目的是排除无关变量对实验的影响，故对照组（CK）的处理为每盆土壤浇50mL无氮植物营养液。
②由柱状图可知，空白对照组中土壤微生物有机氮含量为10，CM12处理组土壤微生物有机氮含量为22，故与对照组相比，CM12处理组土壤微生物有机氮含量增加值大概为（22-10）÷10×100%=120%。
③自生固氮菌比共生固氮菌（如根瘤菌）的应用范围更广，原因是自生固氮菌能在土壤中独立固氮，不受宿主的限制。
20．(1) 内含子 mRNA
(2) 5' 终止密码子
(3) 降低TaqDNA聚合酶的活性；减少引物错配形成的产物 将模板DNA 完全变性、使未完全延伸的产物实现充分延伸 限制酶序列
(4) 慢 超螺旋状的DNA体积最小，在凝胶（凝胶其实是多孔的物质）中的孔中运动的阻力小，因此泳动的快
(5) EcoRI BamHI
(6)可能目的基因没有与载体连接
【分析】多聚酶链式反应扩增DNA片段：
1、PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
2、PCR反应过程是：变性→复性→延伸。
【详解】（1）真核生物基因组中存在内含子序列，在形成mRNA的剪接加工过程中被切除，所以构建Bad基因的克隆时，基因组DNA不能直接用作PCR扩增的模板。在mRNA的的引导下使用逆转录酶来合成cDNA链。
（2）DNA 的合成方向是从5'端到3'端延伸，限制酶会破坏DNA序列，所以在引物的5'端加上不同的限制酶切位点序列，第三步为了保证抗原标签与mBad基因表达产物中氨基酸顺序正确，有时需要补加核苷酸，有氧终止密码子会导致翻译的终止，所以补加的核苷酸不能产生终止密码子，否则会导致蛋End白质分子量的减小。
（3）冷启动法可降低TaqDNA聚合酶的活性；减少引物错配形成的产物。Step1，94℃ 5min，目的是将模板DNA 完全变性；Step8，72℃ 10min的目的是使未完全延伸的产物实现充分延伸。由于Step3引物含有添加的限制酶序列，不能和模板完全匹配，所以Step3的温度比Step6要低一点。
（4）电泳是根据DNA分子的大小进行分离的技术，双链DNA分子越大则电泳迁移速率越慢。因为超螺旋状的DNA体积最小，在凝胶（凝胶其实是多孔的物质）中的孔中运动的阻力小，因此泳动的快，线状的DNA在孔内运动阻力很大，因此泳动慢。
（5）由于SmaI和HindIII的酶切结果都是平末端，不容易连接，所以一般用EcoRI和BamHI两种限制酶进行切割目的基因，然后用E.coliDNA连接酶形成重组质粒。
（6）目的基因没有与载体连接，空质粒导入细菌细胞也会出现阳性重组子细菌，所以筛选得到的阳性重组子细菌还需要进一步通过DNA测序鉴定。
21．(1) 多种 克隆化培养 使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的
(2) 怀孕后尿液中含有 HCG，单克隆抗体可以与它特异性结合，从而诊断早孕 免疫排斥反应
(3) 愈伤组织 液泡 胚状体 无性生殖
(4)能保持植物原有的遗传特性、繁殖速度快
【分析】1、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。
2、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】（1）免疫处理的小鼠产生相应的B淋巴细胞群，能合成并分泌多种抗体，而1个浆细胞只能合成一种抗体；步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养及抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行；用多孔培养板培养时，需要稀释，其目的是使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的。
（2）人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体本质为蛋白质，所用检测早孕的方法为抗原-抗体杂交，生产的单克隆抗体可以与人绒毛膜促性腺激素（或HCG）特异性结合，怀孕后尿液中含有 HCG，单克隆抗体可以与它特异性结合，从而诊断早孕。为避免鼠源性单克隆抗体进入人体后被人体免疫系统识别并清除，降低免疫排斥反应，在注射前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段。
（3）液泡中含有无机盐、糖类等有机物，故若利用植物组织培养技术，可将龙井茶叶细胞培养到愈伤组织阶段，愈伤组织细胞呈高度液泡化，然后从其液泡中提取茶碱；若要获得神奇的人工种子，可将龙井茶叶细胞培养到胚状体阶段，经过人工薄膜包裹得到人工种子；由于该过程中没有经过精卵结合，故生殖方式为无性生殖。
（4）植物组织培养为无性生殖，与常规育种相比，植物组织培养技术产生的植株特点是：能保持植物原有的遗传特性、繁殖速度快等。
【点睛】本题考查了制备单克隆抗体和植物组织培养的的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力。
22．(1) 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） 95%空气和5%的CO2
(2) 激活重构胚， 使其完成细胞分裂和发育进程 显微注射法
(3) 二 桑椹胚或囊胚
(4) 胚胎干细胞 相应器官
(5) 动物细胞融合（孤雌单倍体胚胎干细胞和孤雄单倍体胚胎干细胞融合） 生殖隔离
【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【详解】（1）用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理组织可分散成单个细胞，故利用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理一只流产猕猴胎儿的皮肤，获取分散的成纤维细胞，制备细胞悬液。动物细胞培养过程中，恒温箱的气体条件是95%空气和5%的CO2。
（2）结合图可知，注入的神秘浓度比的药物的作用是激活重构胚， 使其完成细胞分裂和发育进程。图1中的重组细胞是动物细胞，将神秘浓度比的药物注入细胞的方法是显微注射法。
（3）卵母细胞培养到减数第二次分裂中期时，细胞已经成熟，具备受精能力，故卵母细胞要发育到减数第二次分裂中期时才适合核移植，早期胚胎要发育到桑椹胚或囊胚时才适合进行胚胎移植。
（4）通过体细胞克隆猴的研究，我们将来会找到方法，让高度分化的人体细胞逆向生成胚胎干细胞，并诱导胚胎干细胞克隆出相应器官用于替换人体相应病变结构。
（5）图2过程涉及的现代生物技术有动物细胞培养、早期胚胎培养和动物细胞融合（孤雌单倍体胚胎干细胞和孤雄单倍体胚胎干细胞融合）。由题干可知，大鼠和小鼠是两个远亲物种，二者之间存在生殖隔离，自然状态下无法完成受精作用，或者即便能完成也不能发育，因此不用大鼠和小鼠直接交配制备异源二倍体胚胎干细胞。
23．(1) 脱分化、再分化 全能性 分生区附近的病毒极少，甚至无病毒
(2) 消毒 无菌水 （高压蒸汽）灭菌
(3)生长素类
(4) 2 生根 小于1
【分析】分析题图：在植物组织培养时，通过调节生长素和细胞分裂素的比值能影响愈伤组织分化出根或芽。生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长。所以图中激素Y是生长素，激素X是细胞分裂素。
【详解】（1）外植体经过脱分化、再分化等过程能够发育成完整植株，体现了植物细胞有全能性。若培育脱毒组培苗，由于分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，因此通常选取植株分生组织（如茎尖或根尖）作为外植体。
（2）在超净工作台上，先后用75%酒精和0.1%的氯化汞对草莓匍匐茎尖进行消毒，每次处理后均需用无菌水冲洗3至5次，然后接种到经灭菌的培养基上。
（3）据题图分析可知，生长素用量与细胞分裂素用量的比值高时（大于1），有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时（小于1），有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时（等于1），促进愈伤组织的生长。由图可知，当植物激素Y用量越高时，有利于根的分化，而当植物激素X用量越高时，有利于芽的分化，所以图中激素Y是生长素，激素X是细胞分裂素。
（4）从表中可以看出，处理组2草莓的萌芽率和增殖系数显著高于其他组，该组激素配比可用于草莓的快速繁殖。若将组培苗移植到大田中种植，还需要诱导生根。结合图1分析，生长素用量大于细胞分裂素用量时，有利于根的分化，因此6-BA与IBA比值应小于1，这样有利于根的分化。
【点睛】本题考查植物组织培养的相关知识，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断。
答案第1页，共2页
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